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Con el aumento de los anticuerpos monoclonales humanos terapéuticos, se han desarrollado ensayos de inmunohistoquímica (IHC) para cribar y detectar antígenos humanos en tejidos humanos.¹ Si bien la cuantificación de ensayos de campo claro no siempre es fácil, el uso de ensayos de inmunofluorescencia (IF) está creciendo rápidamente porque se utilizan datos cuantificables El software de imágenes especializado está fácilmente disponible. Un ensayo humano sobre humano que utiliza IF es ventajoso para la detección eficaz de estos anticuerpos en tejido humano, ya que proporciona información valiosa sobre el potencial de un anticuerpo como tratamiento terapéutico².
Si bien el kit de polímero HRP Human-on-Human de Biocare Medical se diseñó originalmente para visualizarse mediante el uso de un cromógeno, el uso de un fluoróforo puede ser una simple sustitución. Para cualquiera de los métodos, el anticuerpo humanizado debe marcarse primero con digoxigenina. Después de que el anticuerpo primario marcado se haya incubado en el tejido, se aplica un secundario anti-digoxigenina de ratón. Después de su incubación, se aplica el polímero HRP de ratón MACH 2 (incluido en el kit) y un cromógeno a los portaobjetos de IHC, mientras que para la visualización de IF se utiliza un conjugado fluorescente anti-ratón. A continuación, el tejido se contratiñe con hematoxilina para IHC o DAPI para IF y se monta en consecuencia.
Para ejemplificar esta sustitución, se detectaron anticuerpos monoclonales humanos HER2, CD6 e histona mediante IHC e IF utilizando el kit Human-on-Human de Biocare. Después de comparar los resultados de ambos métodos, se observaron patrones de tinción idénticos mientras que la tinción IF produjo resultados precisos y cuantificables con poco o ningún fondo.³
Los ensayos de inmunofluorescencia humano sobre humano proporcionan un método sencillo y fiable para detectar y cuantificar anticuerpos humanizados en tejido humano, lo que resulta especialmente útil cuando se investigan posibles tratamientos terapéuticos.
Para obtener más información sobre el polímero HRP humano sobre humano, comuníquese con nosotros en cualquier momento al 55 56.77.95.11 Consulte el kit aquí: https://biocare.net/product/human-human-hrp-polymer/.
1. Chames, P, et al. Therapeutic antibodies successes, limitations and hopes for the future. Br J Pharmacol. 2009; 157(2):220-33 2. Figueroa S., et al. The development of an immunofluorescence assay in the detection of human antibodies in human tissues. 44th Annual NSH Symposium/Convention. National Society of Histology. America’s Center Convention Complex, St. Louis, MO. 20 Sept. 2018. Poster Presentation 3. Vargas J., et al. A simple and rapid method for the detection of human and/or humanized antibodies on human tissues by immunohistochemistry. 43rd Annual NSH Symposium/Convention. National Society of Histology. Gaylord Palms Resort & Convention Center, Kissimmee, MO. 17 Sept. 2018. Poster Presentation1. Chames, P, et al. Therapeutic antibodies successes, limitations and hopes for the future. Br J Pharmacol. 2009; 157(2):220-33 2. Figueroa S., et al. The development of an immunofluorescence assay in the detection of human antibodies in human tissues. 44th Annual NSH Symposium/Convention. National Society of Histology. America’s Center Convention Complex, St. Louis, MO. 20 Sept. 2018. Poster Presentation 3. Vargas J., et al. A simple and rapid method for the detection of human and/or humanized antibodies on human tissues by immunohistochemistry. 43rd Annual NSH Symposium/Convention. National Society of Histology. Gaylord Palms Resort & Convention Center, Kissimmee, MO. 17 Sept. 2018. Poster Presentation
